抗日战争时期，鲁南临城、枣庄一带的铁路线上活跃着一支游戏队，队员在大队长刘洪（曹会渠）、政委李正（冯奇）的领导组织下，配合主力部队给予了日军沉重的打击，被当地百姓亲切地称为“飞虎队”。

日军想法设法偷袭“飞虎队”，终使刘洪受伤，但刘洪因此得以被寡妇芳林嫂（秦怡）照料，成就一对爱人。刘洪伤愈后，配合李正指挥作战，大败日军。恼羞成怒的日军欲以肆意杀戮之法激怒刘洪，刘洪中计，准备在微山湖与日军展开正面交锋，幸得李正及时劝阻，“飞虎队”力量才得以保全。修整后的“飞虎队”将沿线日军悉数歼灭，但芳林嫂却在执行侦察任务时被捕……

影片也注意突出主旋律，充分展现了游击队员们的革命乐观主义精神。影片渲染紧张气氛的同时，还注意穿插了抒情的环节，反映了战士们朴素美好的内心世界。影片插曲旋律优美，朴素真切，自问世后被广为传唱。